細(xì)胞培養(yǎng)過程中的血清沉淀

在日常實驗過程中，一些同學(xué)或多或少都會遇到血清出現(xiàn)沉淀的情況。那么問題來了：

血清中的沉淀是什么？

這些沉淀是如何產(chǎn)生的？

沉淀對細(xì)胞培養(yǎng)會造成影響嗎？

如何減少血清沉淀？

如果你也關(guān)心這些問題，那就跟著我們一起，來到今天的血清科普小課堂吧，幫你一篇理清血清沉淀的各種問題！

細(xì)胞培養(yǎng)中

血清沉淀從何而來？

一般來說，血清沉淀的成分可以簡單分為以下幾種：

1、纖維蛋白：常見的體積比較大的沉淀物，達(dá) 1-2mm，肉眼可見。因為一些血清在收集和快速處理過程中，存在纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體），處于溶解狀態(tài)，但經(jīng)過濾分裝后，就會在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白的沉淀。

2、磷酸鈣：會使血清出現(xiàn)渾濁的一種沉淀物，并且在 37℃ 培養(yǎng)時出現(xiàn)增加。這類沉淀物鏡下觀察是一個小黑點，由于布朗運動，它們看上去仿佛可以運動，因此常被誤認(rèn)為是微生物污染。

3、膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)：也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。

細(xì)胞培養(yǎng)中

血清沉淀有何影響？

血清沉淀會影響細(xì)胞生長嗎？

一般情況下，沉淀物不會影響細(xì)胞培養(yǎng)，但如果細(xì)胞對于營養(yǎng)物質(zhì)有特殊需求，沉淀物中的成分不能被細(xì)胞吸收，可能會引起細(xì)胞長勢較差。

血清沉淀會影響細(xì)胞實驗嗎？

會影響血清過濾。一些特殊實驗中，需要對細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行過濾，如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，混入培養(yǎng)基中，會導(dǎo)致過濾孔被堵塞，影響過濾效果。

血清沉淀導(dǎo)致細(xì)胞污染嗎？

一般情況下，正常的沉淀物不會導(dǎo)致細(xì)胞污染。

但多數(shù)情況下，血清沉淀會對我們判斷細(xì)胞是否出現(xiàn)污染造成困擾。

絮狀沉淀容易和真菌、細(xì)菌混淆；磷酸鈣沉淀引起的小黑點容易與支原體污染混淆。

細(xì)胞培養(yǎng)中

血清沉淀從何而來？

剛出廠的血清，應(yīng)該是澄清透明的，為了保證品質(zhì)，血清會儲存在-20℃的環(huán)境中。如果運輸過程中，出現(xiàn)了溫度忽高忽低，反復(fù)凍融的情況，就容易析出大量沉淀。

另外，不正確的解凍方法也會引起血清產(chǎn)生大量沉淀。

細(xì)胞培養(yǎng)中

如何減少血清沉淀？

1、正確的運輸溫度：運輸過程中，要嚴(yán)格-20℃低溫，避免反復(fù)凍融。

2、使用正確的融化方法：在使用時，正確的解凍方法也很重要，這里推薦使用國際上通用的“三步法”解凍。

需要注意的是，如果血清是儲存在-80℃冰箱中，正式解凍前應(yīng)先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中過渡。

一次解凍后，分裝至無菌離心管中，盡量保證每管是一次的用量，分裝管解凍也遵循三步法，解凍后需全部用完。

3、使用正確的儲存方式：長期儲存在 2-8℃或在室溫下放置時間過長，都會引起沉淀，建議配制好的*培養(yǎng)基在4℃冰箱中存放不要超過7天，血清分裝好后-20℃儲存。

4、特殊的處理：γ射線照射與熱滅活也容易引起沉淀析出，因此要注意射線照射劑量以及熱滅活方法（40℃水浴加熱20分鐘即可）。

細(xì)胞培養(yǎng)中

如何去除沉淀？

如果要除去血清中的沉淀，可以將血清分裝至無菌離心管中，大約400g 離心，留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞，因此不建議用過濾的方法。

血清品質(zhì)

沉淀不是檢驗血清的硬指標(biāo)，但為了實驗準(zhǔn)確、實驗美觀、實驗便利，還是應(yīng)該盡量減少沉淀的產(chǎn)生。掌握正確的血清解凍、使用方法，再加上一款品質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)秀血清，對于細(xì)胞實驗來說，至關(guān)重要。

正確的使用方法與優(yōu)質(zhì)的血清，二者缺一不可。

Ausbian品牌胎牛血清，品質(zhì)優(yōu)異，與市場上其他品牌相比，優(yōu)勢明顯：

1. 精選內(nèi)毒素更低批次（≤3EU/ml）。是細(xì)胞典藏等重大項目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。

2. 新批次在試用前，提供試用服務(wù)，養(yǎng)細(xì)胞更放心。

3. 每個批次產(chǎn)量800-2000升，試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定，保證大多數(shù)項目兩年不需換批次，細(xì)胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

4. 每年按廠家生產(chǎn)順序，會有多批次平行供應(yīng)，每個實驗室專屬批號管理，保證供貨穩(wěn)定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持，具有完整的檢測報告，為各類項目的申報提供支持（同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學(xué)驗證等方面，提供更多免費延伸性技術(shù)幫助）。

6. 針對特殊科研項目，可提供3-5個平行批次，讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務(wù)，為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護(hù)，按要求隨時發(fā)貨。

8. Ausbian血清從出廠，到實驗室，全程低溫冷鏈保護(hù)，確保血清無反復(fù)凍融。

9. 免費真品保障，每個血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標(biāo)簽，Ausbian品牌真品保護(hù)，逢假必究，為實驗室做好售后保障。

10. 免費無憂售后，所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清，從簽收日開始計算，一年之內(nèi)，血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下，均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專業(yè)幫助，匯集近二十年，千萬個血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗，為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問題梳理分析，解決方案參考。

12. Ausbian品牌擁有全系列血清產(chǎn)品線：

特級胎牛血清、細(xì)胞治療專用胎牛血清（貨號：WS500T(紅點)），透析胎牛血清 （貨號：VS500TZ ）等多系列產(chǎn)品，服務(wù)更專業(yè)更精準(zhǔn)